常見故障
液相色譜儀系統(tǒng)可能出現(xiàn)的故障是:
1.流動(dòng)相脫氣不充分;
2.流動(dòng)相供給不暢;
3.流動(dòng)相和貯液器被污染等。
一、流動(dòng)相脫氣不充分
流動(dòng)相受熱,或者流動(dòng)相不同組分混合時(shí)會(huì)有氣體產(chǎn)生,氣泡進(jìn)人泵內(nèi)引起壓力波動(dòng),增加噪音,色譜圖上出現(xiàn)毛刺。可試用下列方法解決問(wèn)題流動(dòng)相再脫氣采用更有效的脫氣方法(如通氮?dú)獗Wo(hù))或兩種方法配合使用改系統(tǒng)內(nèi)混合為系統(tǒng)外低壓預(yù)混合。如果仍有毛刺,應(yīng)考慮在檢測(cè)器后面加阻尼器。
二、流動(dòng)相供給不暢
流動(dòng)相供給不暢可能的原因是流動(dòng)相已接近用完了,管路中吸人氣體引起泵壓力不穩(wěn)。應(yīng)經(jīng)常觀察貯液器中流動(dòng)相的量,加足流動(dòng)相保證所有的樣品分析完畢。輸液管路上安裝沉子沉至瓶底,貯液器蓋上留一小孔正好夾住進(jìn)液管,使其不能上下移動(dòng)。過(guò)濾器阻塞會(huì)引起管道和泵腔空化,使壓力不穩(wěn)。當(dāng)過(guò)濾器被微粒所阻塞或長(zhǎng)霉時(shí),去掉過(guò)濾器后系統(tǒng)會(huì)運(yùn)轉(zhuǎn)正常,換上新過(guò)濾器即可。有時(shí)候換上新過(guò)濾器仍然不暢,那就需要檢查流動(dòng)相的制備過(guò)程,或者換大孔徑的過(guò)濾器。不管如何,流動(dòng)相都要重新過(guò)濾。流速過(guò)高、阻力大,造成空化現(xiàn)象,這是由于過(guò)濾器孔徑、管道內(nèi)徑、流速和溶劑黏度等引起的。
出現(xiàn)這種現(xiàn)象,試用下列方法解決
1.試用低流速,若問(wèn)題解決了則再進(jìn)行下一步
2.換大孔徑的過(guò)濾器
3.增加進(jìn)液管路內(nèi)徑
4.抬高或加壓貯液器
5.改低流速
6.不用入口過(guò)濾器(但流動(dòng)相一定要先過(guò)濾)。
當(dāng)貯液器蓋子太緊,在貯液器內(nèi)形成真空,打出的流動(dòng)相不連續(xù)。應(yīng)松開蓋子或留有l(wèi)mm的縫隙。進(jìn)液管路阻塞或彎曲折疊會(huì)使泵抽不到液,注意調(diào)整進(jìn)液路道或更新。其它問(wèn)題,包括滲漏或接頭松動(dòng)、低壓混合器過(guò)濾器阻塞、泵部件損壞(密封墊等),都能引起供液不正常。
三、貯液器或流動(dòng)相被污染
由于貯液器或流動(dòng)相被污染,會(huì)出現(xiàn):產(chǎn)生的有規(guī)則的噪音增大、檢測(cè)器基線上升。流動(dòng)相中污染物可能被泵以穩(wěn)定的濃度打入系統(tǒng),而后再以穩(wěn)定的濃度流出來(lái),所以在色譜圖中不出多余的峰。
用梯度洗脫時(shí),弱流動(dòng)相條件可使污染物聚在柱頂,流動(dòng)相強(qiáng)度增加后污染物可能被洗脫出來(lái)一個(gè)大的鬼峰。有時(shí)液相色譜儀基線噪音突然增大或突然抬高,都是因?yàn)榉磸?fù)加進(jìn)新流動(dòng)相或系統(tǒng)用得太久(如通宵)造成的。新加進(jìn)的流動(dòng)相中有污染物或者流動(dòng)相長(zhǎng)霉,繁殖了細(xì)菌。不干凈的貯液器會(huì)污染清潔的流動(dòng)相。每種流動(dòng)相備有的貯液器,或者定期報(bào)廢貯液器,都是良好的工作習(xí)慣流動(dòng)相污染源來(lái)自這幾個(gè)方面試劑質(zhì)量不高玻璃器皿不合格微生物的影響;配制流動(dòng)相時(shí)操作不當(dāng)?shù)取R虼艘笥酶呒兌然瘜W(xué)試劑和HPLC級(jí)溶劑。一旦發(fā)現(xiàn)試劑有問(wèn)題應(yīng)堅(jiān)決報(bào)廢掉。
玻璃器皿應(yīng)按規(guī)定清洗干凈。為防止生長(zhǎng)微生物,每天要按前述的方法清洗系統(tǒng)。懷疑系統(tǒng)內(nèi)生長(zhǎng)了微生物時(shí),可用稀硝酸沖洗(注意不要損壞柱和管路系統(tǒng))。在緩沖液內(nèi)加生長(zhǎng)抑制劑(0.04%疊氮鈉)或冷藏緩沖液,每天用0.2μm的過(guò)濾器過(guò)濾緩沖液,也會(huì)有效地防止微生物污染系統(tǒng)真空脫氣時(shí)要防止泵油帶入流動(dòng)相。應(yīng)該用清潔的惰性塞子、攪捧、過(guò)濾器和玻璃器皿配制流動(dòng)相。已經(jīng)污染的色譜儀流動(dòng)相一定要廢棄掉。