高效液相色譜(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)是一種分析化學技術,用于分離、鑒定和定量混合物中的各個組分。它是液相色譜的一種形式,通過高壓將溶劑和樣品混合物通過填充有固定相(固定床)的色譜柱來實現分離。與傳統液相色譜相比,HPLC具有更高的分離效率、更快的分析速度和更高的靈敏度。
工作原理:
樣品準備:將待分析的樣品溶解在適當的溶劑中,形成樣品溶液。
進樣:通過進樣器將樣品溶液注入流動相中。
流動相傳輸:高壓泵將流動相(通常是單一溶劑或混合溶劑)以穩定的流速泵入裝有固定相的色譜柱。
分離:樣品中的各組分在色譜柱內因與固定相的相互作用力(如吸附、分配、離子交換等)不同,而以不同的速率移動,從而被分離。
檢測:分離后的組分逐一進入檢測器,根據物理或化學性質被轉化為電信號,記錄為色譜圖上的峰。
分析結果:通過分析色譜圖上的峰位置(保留時間)和峰面積(或峰高),可以對各組分進行定性和定量分析。
高效液相色譜作為一種重要的分析方法,因其高分辨率、高靈敏度和分析速度快等優點,在化學、藥學、生物學、環境科學、食品科學、法醫學等領域有著廣泛的應用。