LC-100液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體,又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)。現(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測器、信號記錄系統(tǒng)等部分組成。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較,具有、快速、靈敏等特點。
LC-100液相色譜儀操作步驟:
1、打開電腦;
2、打開主機、預熱;
3、進入儀器工作站,聯(lián)機并設定儀器使用方法及儀器參數(shù);
4、啟動泵的動力系統(tǒng)預處理(排氣等);
5、檢查是否漏夜、柱壓是否正常;
6、設置儀器方法,包括儀器的使用條件等;
7、激活操作方法,等待儀器平衡、基線平直;
8、儀器出現(xiàn)“Ready”后可進行樣品分析;
9、操作測試結(jié)束后,清理所有實驗材料,做好清潔衛(wèi)生;
10、記錄儀器使用日志,并與管理員辦理交接手續(xù)。
目前市面上常見的進樣閥是7725I型進樣閥,我們使用這種進樣閥需注意下面三點。首先我們要注意進樣閥溢流管的堵塞問題,當進樣閥溢流管發(fā)生堵塞我們向閥內(nèi)注射樣品時能發(fā)現(xiàn)注射針推不動,而造成堵塞的原因多數(shù)由于溶解樣品的流動相是鹽溶液,而其中的鹽在溢流管的排空端口處結(jié)晶所致。可以通過用小燒杯盛少量蒸餾水對溢流管口稍加浸泡,端口處鹽的結(jié)晶就能被溶解掉,故障排除。
進樣閥清潔問題也是我們需要注意的事項之一。如果樣品環(huán)中有上次進樣時樣品的殘留,必然會污染下次注射進的樣品,為防止這種現(xiàn)象的發(fā)生,應按下列步驟操作:
a、進樣閥有2個位置,INJECT和LOAD。首先在LOAD位置時,以注射器將流動相注入進樣閥內(nèi)清洗幾次,每次用量大約40ul;
b、然后將進樣閥板手扳至INJECT位置時,再以流動相清洗幾次,每次用量還是40ul;
c、之后,再將樣品注射到進樣閥里。按照上述的步驟操作,可以避免由進樣閥引起的污染,從而使干擾峰消除并提高分析結(jié)果的準確性。
后一點需要注意的是進樣量的控制。用色譜進樣閥來進樣時,閥內(nèi)的樣品環(huán)是定量的,由于進樣時,注射到進樣閥內(nèi)的樣品溶液在樣品環(huán)的管路中有徑向的速度梯度,因此,要想使樣品環(huán)中充滿樣品溶液,從而使用進樣閥來準確地定量,則必須使進樣量大于樣品環(huán)體積的2倍。