高效液相色體包括儲液器、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀或數據工作站等幾部分譜儀一般由溶劑輸送系統、進樣系統、分離系統、檢測系統和數據處理與記錄系統組成。高效液相色譜儀是應用高效液相色譜原理,主要用于分析高沸點不易揮發的、受熱不穩定的和分子量大的有機化合物的儀器設備。
高效液相色譜儀采用數字化通信,通過個人電腦可以全控液相色譜系統的各單元的各項操作以進行等度分析、多元高壓梯度分析、波長掃描及光譜掃描等功能。液相色譜原理,主要用于分析高沸點不易揮發的、受熱不穩定的和分子量大的有機化合物的儀器設備。廣泛應用于生命科學、食品科學、藥物研究以及環境研究中。
高效液相色譜儀操作工序:
1、配置好實驗所需的流動相(甲醇:水=8:2)和純甲醇,經過濾超聲后備用。
2、打開泵電源。將泵的壓力上限設置為40MPa。
a、將泵的過濾頭輕輕放入到新配好的純甲醇中,設置流量為1ml,然后按“啟動/停止”鍵開始走液,經過10-20分鐘后按“啟動/停止”鍵停止走液;
b、將泵的過濾頭輕輕放入到新配好的甲醇水中,然后按“啟動/停止”鍵開始走液;
c、打開檢測器電源,調整好檢測器的波長280,然后按“調零”鍵調零。
3、打開電腦上的UC-3268色譜工作站,左上方出現握手圖標,說明工作站已連接儀器。然后查看基線等基線走直即可進樣。
4、進樣之前先看基線在不在界面內,如果不在按“調零”鍵調零,之后再開始進標樣,將液體進樣閥扳到“LOAD”位置,將標樣打入液體進樣閥內,再把液體進樣閥扳到“INJECT”位置,此時工作站已啟動,等峰出完后點“停止”鍵。
5、做校正曲線:
a、編輯定量參數:
點擊“定量參數”圖標,彈出方法編輯窗口:設置好定量方式:(峰面積)、定量方法(外標法)、標準(1個濃度標樣,選1點)、次方(1次)、標樣濃度單位(%)、樣品結果單位(%);
b、填寫組份表:點擊“組份表”圖標,彈出方法編輯窗口,填入所分析的樣品組份名稱、保留時間及標準濃度(100);
c、定義校正曲線:
點擊“校正曲線”圖標,彈出方法編輯窗口。
定義各點對應的色譜峰文件。即先用鼠標指向標樣點號,然后單擊左鍵,則該點號被藍框覆蓋,再單擊右鍵,彈出右鍵可選菜單:
選擇“增加”項,彈出“譜圖選擇”窗口。
然后在此選擇相應的譜圖文件,則該序號點的文件前出現一個“+”號。各個點定義完成后,單擊“重校正”即可顯示出校正曲線。點“確認”鍵。
6、進樣品,出完峰后點停止,點屏幕報告即可查看結果。如有多個樣品,可重復 進樣品 此步驟即可。
7、查看以前樣品結果:進入“再處理”界面,點擊“打開數據文件”圖標,彈出“譜圖選擇”窗口在此選擇樣品譜圖文件,如下:然后要單擊“重新計算”按鈕,再點擊“屏幕報告”圖標。
8、關機:關閉檢測器電源,按“啟動/停止”鍵停止泵運行,將泵的過濾頭輕輕放入到新配好的純甲醇中,按“啟動/停止”鍵開始走液,經過10-20分鐘,泵壓力穩定后,按“啟動/停止”鍵停止走液,關閉泵電源。電腦不用可提前關閉。